第522章 离心机分离提取(1/4)
整个提取过程从下午一点开始。
苏寒先用玛瑙研钵把水泥碎屑研碎。研得很细，粉末状，力道控制得刚好——太大信号不够，太过头核酸也碎了。
沈逸飞端了一把椅子坐在旁边，胸前的运动相机还在录。
“师兄，你这个研磨力度是怎么把握的？有量化标准吗？”
“没有。手感。”
沈逸飞在笔记本上写：“手感（暂无法量化）。”
苏寒把研碎的粉末转移到一个15毫升的离心管里，加入预先配好的裂解缓冲液——含SDS去垢剂、蛋白酶K、螯合剂EDTA。
“水泥基质的主要成分是硅酸钙，碱性环境。DNA在碱性条件下会降解，所以缓冲液的pH要压到偏酸性，6.5左右。蛋白酶K用来消化变性蛋白——包括那些被高温烧变性的血红蛋白。”
沈逸飞飞快地记。
“EDTA螯合二价金属离子，抑制核酸酶活性，防止提取过程中残余的DNA被酶切掉。”
苏寒说完这些，把离心管放进恒温摇床，设定56度，180转。
“震荡两小时。让缓冲液充分渗透水泥颗粒，把里面的生物分子洗脱出来。”
“两小时？”沈逸飞看了看表。“那我——”
“你可以先去吃饭。”
“我不饿。”
苏寒看了他一眼。“我饿。帮我带个饭。”
沈逸飞这才跑出去了。
下午三点，摇床停了。苏寒取出离心管，液面浑浊，灰褐色，看上去就是一管脏水。
他先做第一轮离心。3000转，十分钟。管底沉下去一层灰白色的沉淀——水泥??ite颗粒。上层液体变成了浅棕色。
苏寒用移液器小心地把上清液吸出来，转移到一个新的离心管里。弃掉沉淀。
“第一轮离心去大颗粒。”他头也没抬地说。
沈逸飞在旁边应了一声，相机对着操作台。
第二轮离心。12000转，二十分钟。高速离心之后，管底出现了一层极薄的、几乎看不见的膜状沉淀。
苏寒把管子举到灯下。
那层膜是淡白色的，薄得像是贴在管壁上的一片影子。
“这就是目标物。变性蛋白和DNA的混合物。如果里面有DNA的话。”
沈逸飞凑过来看，鼻尖差点怼到管壁上。
“看到了看到了。”他说，语气里带着一股不正常的亢奋。
苏寒把上清液倒掉，往管底的沉淀里加入纯化试剂，轻柔地吹打混匀。然后进入第三步——梯度离心。
这一步最关键，也最
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